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      HILIC親水液相色譜柱的使用

      更新時間:2017-09-08 點擊次數(shù):3293
      HILIC親水液相色譜柱的使用:
      HILIC親水液相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。
      但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結果才有可比性。
      1、樣品的前處理:
      a、使用流動相溶解樣品。
      b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
      c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
      2、流動相的配制:
      HILIC親水液相色譜柱是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:
      a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。
      b、流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學反應(特殊情況除外)。
      c、流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
      d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,使用對紫外吸收較低的溶劑配制。e、流動相沸點不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導致實驗無法進行。
      f、在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

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