純水色譜柱，耐受原理知一二

哈哈，看到月旭的色譜柱給老師們解決了實驗問題，小編心里真是很樂滋滋呢~月旭的AQ色譜柱也是可以耐受100%純水相的色譜柱，對強極性化合物的保留的確很不錯的。那么對于常見的反相C18色譜柱，能夠耐受100%水相的還有哪些呢？耐受的原理又是如何呢？今天就跟小編一起來了解一下吧~

疏水基團低鍵合密度

我們都知道，反相C18色譜柱在保留時，水相比例一般不宜大于90%，而極性化合物在C18柱上的保留行為較弱，有時甚至有機相比例降至5%也沒有很好的保留，但過高比例的水相易使C18鏈發(fā)生蜷縮，得不到充分的潤濕和舒展，大大降低C18色譜柱的保留能力。像上面對話中老師用到的月旭Ultimate® AQ-C18色譜柱，就是通過降低疏水基團（即C18）的鍵合密度，da程度降低C18鏈的坍縮，從而大限度地增加極性化合物的保留。月旭Ultimate® AQ -C18色譜柱在高含水量的流動相中，對有機酸、核苷等水溶性強極性化合物具有較好的保留能力。

圖1 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離6種有機酸

圖2 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離5種核苷酸

側鏈基團位阻

普通C18鏈對于水相的不耐受還體現(xiàn)在高比例水相或鹽相下，鍵合相易受到水分子或鹽分子的作用從而造成鍵合相水解脫落。對于這一作用，月旭科技的Ultimate® LP-C18則完美的解決了該問題。通過在C18烷基側鏈引入較大的官能團，其空間立體效應阻礙了流動相分子對鍵合相硅氧鍵的作用。同時，由于Ultimate® LP-C18的未封尾特性，使得該系列色譜柱在酸性條件下（pH可低至0.5）依舊擁有*的耐受能力。

圖3 月旭Ultimate® LP系列色譜柱鍵合相示意圖

封尾工藝

常見的C18色譜柱都是使用*基氯硅烷封尾試劑來對色譜柱進行封尾，而如果使用含有極性官能團，或含有親水端基的封尾試劑進行封尾，就能夠很好地改善與100%水相的兼容性，同時，由于加入了極性親水基團，取代了大量的硅醇基位點，在分析堿性化合物的時候能有效防止堿性化合物與硅醇基的相互作用，改善峰形。月旭Ultimate®ODS-3色譜柱，月旭Ultimate® ALK-C18色譜柱等，就是采用的該鍵合工藝。

圖4 極性親水基團試劑封尾工藝

極性基團嵌入

給色譜柱鍵合相嵌入極性基團的作用原理類似于極性基團封尾，區(qū)別是極性基團加入的位置是嵌入到C18鏈中。極性嵌入基團有利于增加水分子在烷基鏈表面的濃度，提高對極性化合物的保留，及水相的耐受，例如月旭Ultimate® Polar-RP色譜柱。

圖5 極性嵌入基團C18柱

極性官能團的嵌入，也可以通過氫鍵作用，將硅羥基或解離的硅氧負離子屏蔽起來（見下圖），進而保證堿性化合物的峰形。

圖6 月旭Ultimate® Polar-RP內嵌極性官能團對硅氧負離子的屏蔽作用

這樣看來，分析極性親水化合物的時候，可耐受純水的色譜柱真是優(yōu)勢明顯呢，難怪老師們對月旭的色譜柱贊美有加了。耐受純水的色譜柱由于上述種種工藝的不同，有時在方法開發(fā)的時候還能提供不一樣的保留特性，使得許多分離復雜極性樣品的問題迎刃而解。