高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70bar時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。
高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
如何更好的使用高效液相色譜柱，延長柱壽命？
1、拿到高效液相色譜柱后先閱讀說明書，了解具體性能：耐受溫度、耐受PH等。以及沖洗和保存條件。經(jīng)過柱校測(cè)試確認(rèn)本身沒有問題后方可正常使用。
2、樣品充分前處理，確保樣品的潔凈；使用保護(hù)柱或在線過濾器，根據(jù)實(shí)際情況更換保護(hù)柱芯或?yàn)V片。
3、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。
4、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽，避免出現(xiàn)鹽析。
5、選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞，PH過低共價(jià)鍵斷裂，鍵和相水解；PH過高硅膠溶解。
6、使用過程中，如果壓力升高，或出現(xiàn)污染，選擇適當(dāng)?shù)臈l件沖洗或反沖。
