HPLC常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法之-壓力

原因：

通常為單向閥被堵死。

解決方法：

1）將入口單向閥和出口單向閥小心拆卸下來(lái)，然后置于預(yù)先加入純化水的玻璃燒杯中，純化水超聲10分鐘以上（純化水最好事先加熱至50℃左右），換甲醇超聲清洗15分鐘。

2）將單向閥安裝在泵上（注意所有單向閥的方向均朝上）。 如果采取以上方法還不能解決應(yīng)考慮密封圈問(wèn)題或單向閥磨損，球不光滑等，需要更換損壞部件。

原因：

單向閥寶石球和球座密封不好，流動(dòng)相有回流現(xiàn)象。

解決方法：

1）將入口單向閥和出口單向閥小心拆卸下來(lái)，然后置于預(yù)先加入純化水的玻璃燒杯中，純化水超聲10分鐘以上（純化水最好事先加熱至50℃左右），換甲醇超聲清洗15分鐘。

2）將單向閥安裝在泵上（注意所有單向閥的方向均朝上）。如果采取以上方法還不能解決應(yīng)考慮密封面問(wèn)題或單向閥磨損，球不光滑等，需要更換損壞部件。

原因：

一般都是由于流路中有堵塞的原因。

解決方法：

1）首先斷開(kāi)真空泵的入口處，此時(shí)PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，再用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，再檢查。

2）打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯下降，則是過(guò)濾頭堵塞。處理方法：將過(guò)濾頭從流路中取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100PSI（6.7 Bar）以下，過(guò)濾頭正常，再進(jìn)一步檢查。

3）把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。

原因：

一般是由于系統(tǒng)泄漏，擰緊即可。

解決方法：

泵里進(jìn)了空氣，打開(kāi)Purge閥，用3-5mL/min的流速?zèng)_洗，如果不行，則要用專用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。