蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測定

大環(huán)內(nèi)酯類抗生素是利用放線桿菌或小單孢菌生產(chǎn)的具有大環(huán)內(nèi)酯的抗生素的總稱，是由二個糖基與一個巨大內(nèi)酯結(jié)合而成的，它對革蘭陽性菌、支原體、衣原體有較強的抑制能力，屬一種中譜抗生素，按其大環(huán)結(jié)構(gòu)含碳的不同，可分為14元、15元和16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。近年來，作為動物飼料添加劑的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素已成為世界范圍內(nèi)需求量和銷售速度增長最快的抗生素之一，已占世界抗生素市場銷售總值的8.5%，此類抗生素在全球飼料中的使用量僅次于四環(huán)素類抗生素。

自1952年發(fā)現(xiàn)紅霉素（EM）以來，已連續(xù)有竹桃霉素（OM) 、螺旋霉素（SPM)、吉他霉素（KT)、羅紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素（ JM )、克拉霉素及的衍生物問世，并出現(xiàn)動物專用品種如泰樂菌素（TS )、替米考星（TLM）等。屬十四碳大環(huán)的有紅霉素、竹桃霉素；屬十六碳大環(huán)的有泰樂菌素、吉他霉素和螺旋霉素，替米考星是泰樂菌素的半合成化合物，相比于其他大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有相似或更強的抗菌活性。

大環(huán)內(nèi)酯類抗生素經(jīng)口服后能很好地被吸收，廣泛分布于組織，特別是肝、肺、腎組織。細菌對此類抗生素易產(chǎn)生耐藥性。動物經(jīng)過長期喂食后，抗生素及其代謝物在動物組織及器官內(nèi)蓄積，可造成前庭和耳蝸神經(jīng)的損害，導(dǎo)致眩暈和聽力減退，重者造成肝腎的嚴重損害。如不能很好地控制殘留，會對人類健康構(gòu)成嚴重威脅。因此我國制定了紅霉素，螺旋霉素，替米考星，泰樂菌素等7種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的最大殘留量。

Masakazu Horie等采用0.2%偏磷酸-甲醇（60/40，V/V）提取，然后通過OASIS HLB進行凈化：用甲醇水活化后，加入樣品，再用水淋洗，最后用甲醇洗脫，該方法在加標0.2μg/g時，樣品加標回收率為70.4%~93.2%。

GB/T 23408-2009蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法。

樣品溶液：稱取蜂蜜5.00g，于50mL離心管中，加入15mL 0.1mol/L 碳酸鈉緩沖溶液，渦旋混勻1min。 

BRP固相萃取柱（60mg，3mL），用3mL甲醇，5mL水活化；

提取液過柱，棄去；

用5mL水，5mL甲醇+水（2+8）淋洗，棄去，抽干；

5mL甲醇洗脫并收集。

洗脫液50 ℃氮吹至干，加入1mL甲醇+水（4+6），混勻，過0.22μm濾膜，上機。

結(jié)論：

使用月旭Welchrom^® BRP 60mg，3mL檢測蜂蜜中替米考星、螺旋霉素-I、竹桃霉素、紅霉素、羅紅霉素、泰樂菌素、交沙霉素回收率分別為86.5%、79.4%、87.2%、114.8%、91.5%、71.9%、71.7%，樣品回收率滿足要求。